土壤样品的检测和保存 意义和目的：从野外取回的土样，经登记编号后，都需经过一个制备过程——风干、磨碎、过筛、混匀、装瓶，以备各项测定之用。样品制备的目的是：  (1)剔除土壤以外的侵入体(如植物残茬、石粒、砖块等)和新生体(如铁锰结核和石灰结核等)，以除去非土磁的组成部分；  (2)样品适当磨细，充分混匀，使分析时所称取的少量样品具有较高的代表性，以减少称样误差； (3)全量分析项目，样品需要磨细，以使分解样品的反应能够完全和匀致；  (4)使样品可以长时间保存，不至因微生物活动而霉坏 实验步骤  1、风干：将采回的土样，放在木盘或者塑料布上，摊成薄薄的一层，置于室内通风阴干，土样半干时，将大土块捏碎，风干场所力求干燥通风，防止酸蒸汽、氨气灰尘污染。  2、去除杂质：挑除肉眼可见的动植物残体，结核、石砾、少量可弃去，量多可称量计算含量  3、压碎磨细过1mm筛：在木盘或橡皮板上压碎，压不碎的在瓷研钵中磨细，土壤全部过1mm筛，砾石>5%时需要称量计算含量  4、过0.25mm筛：混合后方格法分取50g，瓷或玛瑙研钵研磨后全部过0.25mmm筛（<0.25mm土样）  5、装瓶：将0.25mm筛的土样装瓶，供测有机质以及全量养分（N、P、K）用，加标签，阴凉、干燥房间保存，将剩余部分也装瓶，供一般项目（PH值、速效养分）分析用，加标签（<1mm土样）  二、有机质的测定 1、测定原理  在加热的条件下，用过量的重铬酸钾—硫酸(K2Cr2O7－H2SO4)溶液，来氧化土壤有机质中的碳，Cr2O-27等被还原成Cr+3，剩余的重铬酸钾(K2Cr2O7)用硫酸亚铁(FeSO4)标准溶液滴定，根据消耗的重铬酸钾量计算出有机碳量，再乘以常数1.724，即为土壤有机质量。其反应式为：  重铬酸钾—硫酸溶液与有机质作用：  2K2Cr2O7+3C+8H2SO4=2K2SO4+2Cr2(SO4)3+3CO2↑+8H2O  硫酸亚铁滴定剩余重铬酸钾的反应：  K2Cr2O7+6FeSO4＋7H2SO4=K2SO4＋Cr2(SO4)3+3Fe2(SO4)3+7H2O  步骤：  （1）称样加氧化剂： 
准确称取通过0.25毫米筛孔的土样0.1000—0.5000克，土样数量视有机质含量多少而定。有机质含量大于5%的称土样0.2克以下，4—5%的称0.3—0.2克，3—4%的称0.4—0.3克，2—3%的称0.5—0.4克，小于2%则称0.5克以上。由于土样数量少，为了减少称样误差，
最好用减重法。将称好的土样放入干燥的硬质试管中，用滴定管或移液管准确加入0.4 mol/L(1/6 K2Cr2O7)溶液10毫升（先加入3毫升，摇动试管，使溶液与土混匀，然后再加其余的7毫升），在试管口套一小漏斗，以冷凝蒸出的水 汽，把试管放入铁丝笼中。 （2）将装有8—10个试管的 铁丝笼（每笼应有1—2个试管做空白试验，用灼烧过的土壤代替土样，其他手续均相同）放入温度为185—190℃的油浴锅中（也可用石腊油、磷酸代替菜油或用多孔铝锭代替油浴），要求放入油浴锅温度下降至170—180℃左右，以后必须控制温度在170—180℃，当试管内液体开始沸腾（溶液表面开始翻动，有较大的气泡发生）时记时，缓缓煮沸5分钟，取出铁丝笼，稍冷，用纸擦净试管外部的油液。  （3）等试管冷却后，将试管内溶液倒信150毫升三角瓶中，用蒸馏水少量多次地洗净试管内部及小漏斗的内外，洗涤液均冲洗至三角瓶中，最后总的体积约60—70毫升。滴加加4滴邻啡罗啉指示剂，用0.2 mol/L硫酸亚铁铵或硫酸亚铁溶液滴定，三角瓶中溶液的颜色由橙黄色经兰绿色突变到砖红色  3、计算公式为：  有机质g=[ ((V0-V)C×1.724*0.003×1.1)／样品重×1000  式中：V0—滴定空白液时所用去的硫酸亚铁毫升数。  V—滴定样 品液时所用去的硫酸亚铁毫升数。  C—标准硫
酸亚铁的浓度。mol/L          0.003—1/4碳原子的摩尔质量数 1.1—为氧化校正系数 1.724—有机碳换算成有机质的平均换算系数 4、注意事项  1）.根据样品有机质含量决定称样量。有机质含量在大于50g的土样称 0.1g，20—40g的称0.3g，少于20g的可称0.5g以上。  2.）消化煮沸时，必须严格控制时间和温度。  3.）最好用液体石蜡或磷酸浴代替植物油，以保证结果准确。磷酸浴需用玻璃容器。  4.）对含有氯化物的样品，可加少量硫酸银除去其影响。对于石灰性土样，须慢慢加入浓硫酸，以防由于碳酸钙的分解而引起剧烈发泡。对水稻土和长期渍水的土壤，必须预先磨细，在通风干燥处摊成薄层，风干10天左右。  5.）一般滴定时消耗硫酸亚铁量不小于空白用量的1/3，否则，氧化不完全，应弃去重做。消煮后溶液以绿色为主，说明重铬酸钾用量不足，应减少样品量重做。 三、土壤碱解氮含量的测定 1、目的要求  土壤碱解氮包括无机态氮和部分有机质中医分解的、比较简单的有机态氮，它是铵态氮、硝态氮、氨基酸、酰胺和易水解的蛋白质的总和。它能反映出土壤近期内氮素供应情况，所以又称为土壤有效氮。测定土壤碱解氮的含量对了解土壤的供氮能力，指导合理施肥具有一定意义。  通过实验，了解其测定原理，掌握其测定方法和基本操作技能，
并能比较准确地测定出土壤碱解氮的含量。 方法原理  扩散皿中，用 1.2mol/LNaOH（水田）或1.8mol/LNaOH（旱土）处理土壤，使易水解态氮（潜在有效氮）碱解转化为NH3，NH3扩散后为H2BO3所吸收，再用标准酸溶液滴定，计算出土壤中碱解氮的含量。     水田土壤中硝态氮极少，不需加硫酸亚铁粉，用1.2mol/LNaOH碱解即可。但测定旱地土壤中碱解氮含量时，必须加硫酸亚铁，使硝态氮还原为铵态氮。同时，由于硫酸亚铁本身能中和部分NaOH，因此不需用1.8mol/LNaOH。 3、操作步骤 （1）称取<1mm的风干土样2.00g，硫酸亚铁粉1g混合均匀，置于洁净的扩散皿外室，轻轻旋转扩散皿，使风干土样均匀铺平。 （2）在扩散皿内室加入2%硼酸溶液2ml，并滴加定氮混合指示剂1滴（溶液显微红色）。  （3）在扩散皿外沿涂上碱性甘油，盖上毛玻璃，旋转数次，使周边与毛玻璃完全黏合。  （4）慢慢推开玻璃一边，使扩散皿外室露出一条狭缝，迅速加入 10ml1.0mol/LNaOH溶液，立即盖上毛玻璃，水平轻轻旋转扩散皿，使碱液与土壤充分混匀。  （5）用橡皮筋固定毛玻璃，随后放入40℃恒温箱中，碱液扩散24h后取出（可以观察到内室溶液为蓝色）。  （6）以0.0100mol/L标准标准溶液滴定扩散皿内室硼酸吸收的氨溶液，溶液由蓝变为微红时即为终点。 4、结果计算  土壤速效氮（mg）= V*C*14*1000/m 其中：  M——土样质量  V——标准酸用量（ml） 14——氮原子的摩尔质量（mg/mol)  1000——换算成kg样品中氮的毫克数  C——（1/2H2SO4)硫酸标准溶液物质的量浓度（mol/L)  5、注意事项  （1）扩散皿内室加2%硼酸，并滴加1滴定氮混合指示剂后，溶液必须显微红色，否则需重做。  （2）特质胶水碱性很强，在涂胶水和洗涤扩散皿时，必须特别小心，谨防污染内室造，成错误。  （3）滴定时要用干净玻璃棒小心搅动吸收液，切不可摇动扩散皿。  （4）扩散皿外室加入碱液后，操作必须小心，谨防碱液溅入内室。   实训十 土壤速效磷含量的 测定  （0.5mol/LNaHCO3浸提-钼 锑抗比色法） 一、目的要求  土壤速效磷也称土壤有效磷，包括水溶性磷和弱酸溶性磷，其含量是判断土壤供磷能力的一项重要指标。测定土壤速效磷的含量，可为合理分配和施用磷肥提供理论依据。实验要求了解测定土壤速效磷的基本原理，掌握其测定方法。    二、方法原理  用pH8.5的0.5mol/L的NaHCO3作浸提剂处理土壤，由于碳酸根的存在抑制了土壤中的碳酸钙的溶解，降低了溶液中Ca2+浓度，乡音的提高了磷酸钙的溶解度。由于浸提剂的pH较高，抑制了Fe3+和Al3+的活性，有利于磷酸铁和磷酸铝的提取。此外，溶液中存在着OH-、HCO3-、CO32-等阴离子，也有利于吸附态磷的置换。用NaHCO3作浸提剂提取的有效磷与作物吸收磷有良好的相关性，其适应范围也广泛。  浸出液中的磷，在一定的酸度下，用硫酸钼锑抗还原显色成磷钼蓝，蓝色的深浅在一定浓度范围内与磷的含量成正比，因此，可以用比色法测定其含量。    三、主要仪器 震荡机、分光光度计或光电比色计、天平（0.01g）、三角瓶（250ml）、容量瓶（50ml）、漏斗、无磷滤纸、移液管（10ml）。   四、操作步骤  1.待测液的制备  称取通过1mm筛孔的风干土样5.00g置于250ml三角瓶中，加入一小勺无磷活性炭和0.5mol/L的NaHCO3浸提液100ml，塞紧瓶塞，在震荡机上震荡30min，取出后立即用干燥漏斗和无磷滤纸过滤，滤液用另一只三角瓶盛接。同时作空白试验。  2. 测定  吸取滤液10ml（对含P2O51%以下的样品吸取10ml，含磷高的可改为5ml或2ml，但必须用0.5mol/L的NaHCO3补足至10ml），于50ml容量瓶中，加钼锑抗混合显色剂5ml，小心摇动。30min后，在721或722型分光光度计上用波长660nm（光电比色计用红色滤光片）比色，以空白液的吸收值为0，读出待测的吸光度值。  3.磷标准曲线绘制 分别吸取50mg/L磷标准液0、1、2、3、4、5（ml）于50ml容量瓶中，各加入0.5mol/L的NaHCO3浸提液1ml和钼锑抗显色剂5ml，除尽气泡后定容，充分摇匀，即为0、0.1、0.2、0.3、0.4、0.5mol/L的磷的系列标准液。30min后与待测液同时进行比色，读取吸光度值。再方格坐标纸上以吸光度值为纵坐标，磷mol/L为横坐标便绘制成磷标准曲线。   六、结果计算 土壤速效磷P（mg）=mg/L  * 50/10 *100/m 式中：mg/L——标准曲线上查得磷的浓度数  50——显色溶液的总体积，ml；  100——提取液总体积，ml;  10——吸取滤液毫升数；  m——风干土样的质量，g。  速效钾和缓效钾的测定 一）土壤速效钾的测定——NH4OAc浸提，火焰光度法     1.方法原理     以NH4OAc作为浸提剂与土壤胶体上阳离子起交换作用。     2.主要仪器     火焰光度计、往返式振荡机    3.试剂     （1）1mol/L中性NH4OAc（pH7）溶液 称取化学纯CH3COONH477.09g加水稀释，定容至近1L。用HOAc或NH4OH调至pH7.0，然后稀释至1L。     （2）钾的标准溶液的配制 称取KCl（二级，110℃烘干2h）0.1907g溶于1mol/LNH4OAc溶液中，定容至1L，即为含100μg/mL K的NH4OAc溶液。同时分别准确吸取此100 μg/mL K标准液0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、40.0 mL放入100 mL容量瓶中，用1mol/L NH4OAc溶液定容，即得0、2.5、5.0、10.0、15.0、20.0、40.0μg/mL K 标准系列溶液。     4.操作步骤     称取通过1mm筛的风干土5.00g于100mL三角瓶或大试管中，加入1mol/L中性NH4OAc溶液50mL，塞紧橡皮塞，振荡30min，用干的普通定性滤纸过滤。    滤液盛于小三角瓶中，同钾标准系列溶液一起再火焰光度计上测定。记录其检流计上的读数，然后从标准曲线求得其浓度。    标准曲线的绘制:将钾标准系列浓度溶液，以浓度最大的一个定到火焰光度计上检流计为满度（100），然后从稀到浓依序进行测定。记录检流计读数，以检流计读数为纵坐标，钾（K）的浓度μg/mL为横坐标，绘制标准曲线。    5.结果计算  土壤速效钾（mg/Kg，K）＝待测液（μg/mL，K）×V/m      式中:V——加入浸提剂 mL 数；         m——烘干土样品的质量（g）。       1溶液中的钾用火焰光度法测定   操作步骤：1/100天平称<1mm风干土 5g –放入100ml塑料瓶中—加入50ml/mol/l NH4AC溶液—加盖—震荡30分钟—干过滤—火焰光度计上读数 2标准曲线的制备 吸取100mg/L钾标准液 0.5.10.20.30 ml 放入 50ml容量瓶中，用NH4AC溶液定容，浓度为0.10.20.40.60 mg/l ，在火焰光度计上读数，并绘制标准曲线  3 结果计算  = k(mg/l)* v/m  V:加入侵提液的体积 m-土样质量 k—标准曲线查得   注意事项：1 为了控制条件一致，钾的各级标准液均用NH4AC配置 2含NH4AC的钾标准液放置时间不能过长       水溶性总盐的测定  一 烘干残渣质量法(经典法)  (一)方法原理  含盐的浸出液在水浴上蒸干,用双氧水氧化有机质,残渣在烘箱中烘干,称量,球的可溶性盐总量. (二)测定步骤  洗净的瓷蒸发皿105-110°C烘至恒重(<2mg) →沸水浴上加入50ml浸提液→蒸干→残渣用10%双氧水处理多次（每次2ml左右）→至有机质完全氧化，残渣呈白色后蒸干→105-110°C烘至恒重  （三）计算结果  土壤总盐量（g）=( m2——m1)/m * 1000  m2 残渣和蒸发皿的质量  m1  蒸发皿的质量  m 吸取浸出液相当的土样质量   注意事项  1、待测液的吸取量与土壤含盐量有关，>5g,吸25ml <5g吸50ml保持盐分在0,02~0.2g之间  2、过氧化氢氧化有机质，每次加量使残渣湿润即可，避免氧化太剧烈使盐分溅失  3、有时样品中氧化铁含量过高，使残渣呈黄色或褐色，不能误以为是有机质的颜色，  4、盐分在空气中易吸潮，应在相同条件和时间下冷却称量  5、加热时碳酸氢根质量损 失二分之一   HCO3—   → CO2+H2O+CO32—    精确的计算校正  土壤全盐量（g）=土壤全盐量（残 渣）g+1/2 HCO3— g 6、滤液应尽量清澈否则所含硅酸盐胶体使结果偏高